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晶抗生物为您介绍 试剂数据分析与标曲拟合
更新时间:2024-04-08 点击次数:299次

做完 试剂实验,测完吸光度,数据怎么处理?标准曲线不是直线怎么办?小晶整理了数据处理相关知识,希望对您有帮助。

一、 标准曲线分析步骤

1.标曲和样本孔的每个孔490nmOD值减去1230nm(或970nm)的OD值;

2.再将获得的标曲和样本孔数据分别减去空白孔Blank的OD值;

3.以标曲的浓度为横坐标,以这算出的OD值为纵坐标,拟合标曲(选择R2值大于0.的比较好的拟合方式,必要时可以删除个别差异较大的标曲点进行拟合);

4.计算样本值,将样本减去空白孔的OD值复制,选软件中的“粘贴”,得到的X值再乘以相应的稀释倍数就是终的浓度值。

二、 标准曲线拟合方程

1.直线回归:直线回归是基本、简单的回归分析方法,将所有的测试点拟合为一条直线,其拟合函数方程式为:y=a+bx。一般实际实验中线性的情况下直线回归可以获得较为理想的R2值,如果直线拟合不理想,可以考虑三次曲线、logistic曲线(四参数)等。

2.logistic曲线(四参数)拟合回归方程:竞争法和夹心法都可以用到。它要求X值不能小于0(因为指数是实数,故有此要求)。在很多情况下它都可以拟合 的反应曲线,所以它也成了 试剂中应用广的模型之一。

注:曲线拟合方法虽多,要根据不同类型 本身的特点,选择适合的曲线拟合模型,才能得到合理的实验结果。一般情况下,需要综合考虑标准曲线的趋势走向以及R2值的大小以及样本落值情况。

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